Základní testované biochemické vlastnosti
Průkaz tvorby indolu a přítomnosti β-D-glukuronidasy (COLI test)
COLItest slouží k průkazu enzymu ß-D-glukuronidasy a tvorby indolu z aminokyseliny tryptofanu, tedy k rychlé identifikaci izolátů Escherichia coli.
Enzym ß-D-glukuronidasa štěpí 4-methylumbelliferyl-ß-D-glukuronid, vzniklý 4-methylumbelliferon vykazuje pod UV modrou fluorescenci.
Pracovní postup:
- Čistou kulturu testovaného kmene homogenizujeme v 1 ml sterilního fyziologického roztoku ve zkumavce tak, aby vzniklý zákal odpovídal 3. stupni McFarlandovy zákalové stupnice.
- Zkumavku inkubujeme v termostatu při teplotě
- K testování použijeme 24-hodinovou kulturu.
Vyhodnocení: Po uplynutí inkubační doby nejprve pozorujeme na transiluminátoru při UV 360 nm tvorbu modré fluorescence. Poté přikápneme do zkumavky 4 – 5 kapek Kovácsova činidla a hodnotíme výsledné zbarvení ve zkumavce (růžový prstenec na povrchu).