Kultivace mikroorganismů

Uchovávání a oživování mikrobiálních kultur - 1

Uchovávání na šikmých agarech

Pro běžnou potřebu uchováváme mikroorganismy ve zkumavkách na šikmých agarech, které ukládáme ve stojáncích či úchovných boxech v chladničkách při teplotě 4 – 6 °C. Mikrobiální kultura na šikmém agaru si zachovává životaschopnost asi po dobu 2 – 6 měsíců, poté dochází k vysychání půdy, postupnému odumírání mikroorganismů a kultury je nutné přeočkovat. Pro přípravu šikmých agarů pro uchovávání bakterií se běžně používají základní půdy (GTK agar, živný agar), v případě kvasinek a plísní např. Sabouradův agar.

Aerobní a fakultativně anaerobní mikroorganismy očkujeme hadovitým pohybem na povrch šikmého agaru. U anaerobních nebo mikroaerofilních bakterií používáme místo očkování na šikmý agar vpich do vysoké vrstvy agarové půdy ve zkumavce. Zátky zkumavek je nutné zaparafinovat či převrstvit narostlé kultury na šikmém agaru sterilním parafinovým olejem tak, aby olej o 1 cm převyšoval horní okraj agaru.

U kultur dlouhodobě uchovávaných na šikmých agarech je vhodné nejdříve provést oživení pasážováním přes neselektivní živné bujóny (masopeptonový bujon, GTK bujon, peptonová voda) a teprve potom vyočkovat kulturu na pevnou půdu.