Kultivace mikroorganismů

Metoda zalití

V rutinní potravinářské praxi se tento způsob inokulace používá nejčastěji. Zvolené ředění vzorku se pipetuje sterilní pipetou souběžně do dvou prázdných, řádně označených Petriho misek, a to v množství 1 ml. Inokulum v Petriho miskách se do 15 minut přelije rozpuštěným agarem vytemperovaným na 45±2 °C v takovém množství, aby se vytvořila vrstva o tloušťce asi 2 – 3 mm. Ihned krouživými pohyby pečlivě promícháme půdu s inokulem tak, aby došlo k rovnoměrnému rozptýlení mikroorganismů ve hmotě půdy. Poté umístíme Petriho misky na chladnou vodorovnou plochu, kde se půda nechá zchladnout a ztuhnout. Ztuhlé misky ukládáme do termostatu dnem vzhůru.

Je-li ve zkoušeném vzorku očekávána přítomnost bakterií tvořících na povrchu média povlaky znemožňující počítání kolonií, přelije se utuhlá první vrstva půdy malým množstvím (asi 5 ml) téže sterilní půdy nebo sterilního agaru, opět o teplotě 45±2 °C. Tím se vytvoří tenká vrstva pokrývající původní povrch a povrchové povlaky se nevytvoří. Opakované přelití se provádí např. v případě zalévání agary VČŽG nebo VČŽL.