Kultivace mikroorganismů

Metoda MPN

Tento způsob očkování se používá při stanovení nejpravděpodobnějšího počtu mikroorganismů (metoda MPN – angl. Most Probable Number). Metoda MPN se používá pro stanovení počtu mikroorganismů ve vzorcích, kde se očekává jejich velmi nízký počet. Výsledkem je stanovení hodnoty MPN v 1 ml nebo 1 g vyšetřovaného vzorku.

Sterilní zkumavky se plní obvykle 10 ml sterilní tekuté nebo polotuhé živné půdy. Při stanovení MPN se tekutá půda ve zkumavkách očkuje 1 ml příslušného ředění vzorku či neředěným tekutým vzorkem. Jednotlivá ředění se očkují samostatnými sterilními pipetami paralelně do dvou, tří i více zkumavek dle použité metody.

Série zkumavek naplněných 10 ml živného bujónu se zaočkují 1 ml příslušného ředění vzorku. Podle počtu zkumavek v každé sérii rozlišujeme test třízkumavkový, pětizkumavkový nebo desetizkumavkový. Po inkubaci se u jednotlivých sad spočítají počty zkumavek s viditelným růstem bakterií (zákal, změna barvy média, tvorba plynu apod.), a to se vyhodnotí pomocí statistických tabulek. Výsledkem je stanovení pravděpodobného počtu mikroorganismů (nikoliv kolonií) v 1 ml nebo 1 g vyšetřovaného vzorku.