Kultivace mikroorganismů

Jednostupňová kultivace

Při jednostupňové kultivaci se příslušné množství vyšetřovaného vzorku (obvykle 25 g nebo 25 ml) sterilně vloží do vhodné kultivační nádoby (pevné vzorky do sterilního homogenizačního sáčku, tekuté vzorky do skleněných vzorkovnic).

Vzorek se zalije sterilním pomnožovacím médiem v poměru 1:9; pevné vzorky homogenizujeme, tekuté důkladně promícháme. Množství odebíraného vzorku, kultivačního média i podmínky inkubace (tj. teplota, doba a složení atmosféry) jsou dány příslušnou metodikou.

Po inkubaci provedeme vyočkování sterilní bakteriologickou kličkou nebo skleněnou tyčinkou na povrch vhodné selektivní či selektivně diagnostické pevné půdy a sledujeme nárůst suspektních kolonií. Při výskytu suspektních kolonií stanovovaného mikroorganismu následuje jejich konfirmace.

Příkladem jednostupňové kultivace je pomnožení vzorků v selektivních bujonech při průkazu bakterií r. Campylobacter (bujon podle Boltona), E. coli O157 (modifikovaný bujon TSB + N) či Yersinia enterocolitica.