Metoda ELFA
Kapitola popisuje metodu ELFA a její vužití při stanovení mikroorganismů v potravinách.
ELFA
Fluorescenční imunologická metoda ELFA (Enzyme-Linked Fluorescent Assay) je automatizovaná metoda prováděná na přístroji VIDAS®. Princip reakce je podobný jako u metody ELISA, rozdíl je v použitém substrátu, který je enzymem štěpen na fluorescenční produkt. Vzniklé chemické změny (fluorescence) jsou detekovány pomocí fotodiodového fluorimetru.
Vlastní test se skládá ze dvou částí – komůrky s pevnou fází (SPR®), která je běžně označovaná jako „špička“ a její vnitřní povrch je potažen specifickou protilátkou pro hledaný antigen, a reagenčního stripu, v jehož jamkách jsou promývací a reagenční roztoky potřebné pro provedení testu.
Jednotlivé kroky reakce jsou shodné s provedením sendvičové ELISA metody, tj. vazba antigenů na imobilizované protilátky v SPR®, opakované promytí, vazba konjugátu (tvorba komplexu imobilizovaná protilátka-antigen-konjugát), opakované promytí, přídavek substrátu a výsledná enzymatická reakce.