Postup přípravy živných půd

Při přípravě jednotlivých půd se postupuje dle konkrétní normy nebo podle doporučení výrobce. K rehydrataci půd se používá destilovaná, případně deionizovaná voda. Předepsané množství dehydratované půdy se odváží a nasype se do poloviny potřebného objemu destilované vody ve vhodné nádobě. Zbytek vody se lije po stěnách nádoby, aby došlo k dokonalému spláchnutí prášku. Po promíchání se agarové půdy nechají asi 15 minut bobtnat, nabobtnání agaru umožní jeho snadnější rozpuštění. V případě půd připravovaných z jednotlivých složek je třeba každou složku přidat samostatně, nechat ji rozpustit a teprve poté doplnit vodou na konečný objem. Každou láhev je vždy nutno řádně označit názvem kultivační půdy, datem přípravy a podpisem osoby, která půdu připravila.

Po nabobtnání se směs dobře protřepe a rozpouští se ve vroucí vodní lázni, mikrovlnné troubě či v proudící páře. Během rozpouštění obsah promícháváme, aby nedošlo k sedimentaci částic na dno nádoby. Po dokonalém rozpuštění (na stěnách nejsou viditelné částice agaru) se médium vychladí (teplota se volí dle použitého pH-metru) a provede se úprava pH na hodnotu stanovenou normou či výrobcem. K úpravě pH se používá roztok o koncentraci 1 mol/l NaOH nebo 1 mol/l HCl. Při úpravě pH bereme v úvahu, že sterilizací v autoklávu hodnota pH poklesne zpravidla o 0,1 – 0,2. Proto některé laboratoře úpravu pH provádí až po sterilizaci. Posledním krokem přípravy však zpravidla vždy bývá sterilizace.