Úvod

Prvním krokem v provedení genotypových metod je extrakce nukleové kyseliny a její oddělení od ostatních složek buňky.

Může se izolovat:

  • chromosomální DNA,
  • plazmidová DNA
  • virová DNA či RNA,

Nukleová kyselina se izoluje:

  • přímo ze vzorku,
  • z pomnožovacího média
  • z kolonií mikroorganismu na agarové půdě.

Existuje celá řada metod extrakce a purifikace nukleových kyselin. Při výběru izolační techniky se zohledňuje požadavek na kvalitu a množství nukleové kyseliny, neboť ve velké míře rozhoduje o úspěšnosti navazujících molekulárně biologických metod. Také je brána v potaz časová náročnost, finanční nákladnost metody a zdroj nukleové kyseliny (typ vzorku či druh mikroorganismu).

Kontrola kvality, kvantity a čistoty izolované DNA se provádí gelovou elektroforézou a UV spektrofotometrií.